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elisa試劑盒白介素類實驗中的封閉液小知識
更新時間:2017-11-03   點擊次數(shù):964次

elisa試劑盒白介素類實驗中的封閉液小知識
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:
1、ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數(shù)選擇前者。
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結合上的明膠。
封閉劑的原理就是與酶聯(lián)板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,結合抗體或抗原的時候就不會產(chǎn)生非特異結合了,不會影響實驗的準確度。
tween的作用:雖然不能單獨封閉,但和BSA在封閉時會起到清洗非特異性結合或結合不牢固的蛋白的作用,假如抗體包被在板上會出現(xiàn)YY-
ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎,ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗,把各種ELISA配置方法匯總如下:(1) ELISA實驗包被緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(3) ELISA實驗稀釋液;(4)ELISA實驗終止液(5)ELISA底物緩沖液(6)ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液(7) ELISA實驗ABTS使用液(8)ELISC。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。
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為了保證elisa試劑盒白介素類實驗的準確性,實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔,嚴防交叉污染。
*    RT,避光    25克    順式-9-十八烯醇
*    RT,避光    10克    二硫化芐
*    RT    100克    4-(2-氨乙基)苯磺酰氯
*    RT,避光    25克    N-R添加劑
*    RT    5克    對稱二苯基偶氮羰酰肼
*        500克    膽酸(牛)
*        1公斤    去氫膽酸
*    RT    10克    α-硫辛酸
*    RT    25克    腦磷脂
*        25克    硅藻土G
*    RT,避光    5克    丙烯酸
*        10克    間羥基苯甲酸
elisa試劑盒白介素類

 

 

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