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PCR檢測試劑盒的具體使用步驟您都了解嗎?
更新時間:2022-01-21   點擊次數(shù):986次
  PCR檢測試劑盒的具體使用步驟您都了解嗎?
  PCR檢測試劑盒中含有聚合酶鏈式反應所需要各種試劑組分,如:引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等,PCR反應液混合液中加入檢測樣品,即可進行PCR擴增反應。PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷,陽性樣本將在相應大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。
  PCR檢測試劑盒的具體使用步驟:
  一、準備好試劑與儀器:
  磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
  二、實驗步驟
  1.滴加0.0mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
  2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
  3.取出玻片,置玻片架上,先用0.0mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.0mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
  4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
  5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
  PCR檢測試劑盒的特點:
  1準確可靠,臨床雙盲對照試驗>000例,結果與金標準測序法比對,結果*性大于99%。
  2高靈敏:可檢測低至0ng的人基因組DNA。
  3快速:整個檢測流程只需3小時。
  4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
  5防污染
  6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
 

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