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elisa試劑盒白介素類顯色比空缺還低
更新時(shí)間:2017-09-28   點(diǎn)擊次數(shù):871次

目前常用的幾種elisa試劑盒白介素類方法有:測(cè)定抗體的間接法,測(cè)定抗原的雙抗體夾心法和測(cè)定抗原的競(jìng)爭(zhēng)法等。本實(shí)驗(yàn)采用間接法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)。其主要過程為:首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的凹孔內(nèi),加待測(cè)抗體,保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì),加酶標(biāo)抗抗體,保溫后洗滌,加底物保溫30分鐘后,加酸或堿終止酶促反應(yīng),用目測(cè)或光電 比色測(cè)定抗體量。  
    ELISA試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術(shù)手段。自己也為此苦惱過很長(zhǎng)一段時(shí)間,跟著自己技術(shù)水平得進(jìn)步,或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣,也是熟能生巧吧,現(xiàn)在做方陣,做ELISA已是輕車熟路了,以前檢測(cè)一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的,現(xiàn)在給我十個(gè)八個(gè)的從包被到顯色,一個(gè)工作日基本搞定??墒窃谛吕鲜植倏v過程中老是會(huì)泛起或大或小的題目,本人在剛開始做ELISA時(shí)就面對(duì)良多災(zāi)題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣,好比說花板,假陽(yáng)性,全顯色,全部顯色。
①抗原包被:兔抗人IgG 作為抗原,用包被液l:8000稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。
②洗滌:次日傾去凹孔內(nèi)的液體,洗滌液洗3次。
③封閉:加l00μL/孔封閉液,室溫放置0.5h.
④洗滌:用洗滌液洗3次。
⑤加待測(cè)樣品(一抗):elisa試劑盒白介素類將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清在另-塊板上用PBS 連續(xù)稀釋(按照1:2或1:10),100μL /孔加到 已包被的板上,ELISA試劑盒每個(gè)樣品平行做兩份,PBS或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌:用洗滌液洗3次。
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD138/Syndecan-1    規(guī)格:    0.1ml    多配體蛋白聚糖1抗體
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD14    規(guī)格:    0.1ml    CD14/內(nèi)毒素受體抗體
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD14      規(guī)格:     0.1ml    CD14抗體
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD141    規(guī)格:    0.1ml    凝血調(diào)節(jié)蛋白抗體
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD144/VECD       規(guī)格:     0.1ml    上皮型鈣粘附分子/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白抗體
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD146/MCAM    規(guī)格:    0.1ml    黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗體
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD147/EMMPRIN    規(guī)格:    0.1ml    細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD147/EMMPRIN      規(guī)格:     0.1ml    單核-巨噬細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶抗體
產(chǎn)品名稱:    Anti-CD158a/KIR2DL1    規(guī)格:    0.1ml    NK細(xì)胞抑制性受體2DL1抗體
elisa試劑盒白介素類

 

 

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